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            應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案

            更新時間:2024-09-25      點擊次數:792


            在腫瘤治療領域,化療作為一種傳統和重要的治療手段,主要是通過化學藥物殺滅腫瘤細胞達到治療的目的。然而,由于其非特異性的殺傷作用引起的不良反應一直是患者和醫療人員的難題。隨著基因靶點研究的不斷深入,腫瘤治療的靶向藥物應運而生,目標明確的治療方式給患者帶來更好治療效果的同時也表現出更輕的藥物副反應,因此在臨床上獲得更廣泛的應用場景。替尼類藥物就是典型的靶向藥物代表之一,在非小細胞肺癌、淋巴癌、其他各種實體瘤的治療中作用顯著,臨床上對替尼類藥物血漿分析也對個性化用藥及精準治療具有重要參考意義。


            化合物信息

            名稱

            CAS 號

            分子量

            阿法替尼

            850140-72-6

            485.9

            阿福替尼

            1869057-83-9

            568.6

            阿萊替尼鹽酸鹽

            1256589-74-8

            519.1

            阿美替尼

            1899921-05-1

            525.6

            貝福替尼

            1835667-63-4

            567.6

            伊馬替尼

            152459-95-5

            493.6

            勞拉替尼

            1454846-35-5

            406.4

            奧希替尼

            1421373-65-0

            499.6

            吡咯替尼

            1269662-73-8

            583.1


            實驗室研究發現,對血漿基質來說,部分初代替尼化合物如伊馬替尼,可以通過蛋白沉淀的方法直接進行分析。但對于三代替尼類藥物蛋白沉淀方法的回收率較低,很可能無法滿足分析需求,因此我們開發了基于 SPE 的前處理方法進行分析,具體方案如下。


            應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案

            前處理


            預處理:

            200 µL 血漿加入 200 µL 5% 甲酸水溶液,渦旋,待凈化;


            活化:

            96 孔板依次使用 200 µL 甲醇、200 µL 水活化;


            上樣:

            加載預處理后的血漿至活化后微孔板;


            淋洗:

            650 µL 水溶液淋洗微孔板;


            洗脫:

            用 100 µL 2% 氨水甲醇溶液洗脫 2 次,渦旋混合;


            氮干復溶:

            40 ℃ 氮氣干燥后,加入 200 µL 初始比例流動相渦旋混合,待檢測。


            應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案

            分析

            色譜條件

            色譜柱:Kinetex C18 (2.1×50 mm, 1.7 μm, 100 ?); P/N: 應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案00B-4475-AN

            流動相 A 相:5mM 甲酸銨 - 0.1% 甲酸水溶液

            流動相 B 相:0.1% 甲酸甲醇溶液

            流速:0.5 mL/min

            柱溫:40 ℃

            進樣量:5 μL

            梯度程序見下表:

            時間 (min)

            流速 (mL/min)

            B (%)

            0

            0.5

            20

            0.5

            0.5

            40

            2.8

            0.5

            70

            3.0

            0.5

            100

            4.0

            0.5

            100

            4.5

            0.5

            20

            6.0

            0.5

            20


            質譜條件

            離子源類型:電噴霧離子源(ESI+)

            掃描方式:多反應監測正負離子模式(MRM)

            噴霧針電壓:5500 V

            離子源溫度:500 ℃

            加熱器(GS1):60 psi

            輔助加熱氣(GS2):60 psi

            氣簾氣(CUR):40 psi

            碰撞氣(CAD):10 psi


            應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案

            結果(藥物譜圖未呈現完)

            加標回收實驗結果

            名稱

            加標濃度 ppb

            相對回收

            %

            RSD

            (N=6)

            基質效應

            %

            阿法替尼

            10

            82.3

            3.7

            +38.3

            阿福替尼

            6.25

            56.5

            3.9

            +2.76

            阿萊替尼鹽酸鹽

            5

            81.5

            3.5

            +19.1

            阿美替尼

            12.5

            72.7

            4.6

            -7.1

            貝福替尼

            25

            63.5

            3.1

            +7.5

            伊馬替尼

            10

            82.3

            3.4

            -0.7

            勞拉替尼

            10

            87.9

            4.6

            +40.1

            奧希替尼

            10

            72.3

            8.4

            -2.7

            吡咯替尼

            5

            87.0

            8.2

            +8.6


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            伊馬替尼線性圖

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            勞拉替尼線性圖


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            產品

            產品

            規格

            貨號

            PCX 96-Wellplate

            5mg/1mL/well,

            2/Pk

            應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案CX00501-MW

            Kinetex C18

            2.1×50 mm,

            1.7 μm, 100 ?

            應用案例 | 替尼類藥物的血漿分析方案00B-4475-AN




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